HEPES和HEPES-Na的區(qū)别及配制

发布时间: 2021-09-10

关键词：生物(wù)缓冲剂、HEPES、4-羟乙基哌嗪乙磺酸

  HEPES中文(wén)全称 4-羟乙基哌嗪乙磺酸，CAS号為(wèi)：7365-45-9，pH 缓冲范围6.8 - 8.2 ，在25℃下，其pKa 值為(wèi)7.5。HEPES-Na即N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)钠盐，其CAS号為(wèi)75277-39-3。HEPES和HEPES-Na都是非常重要的生物(wù)缓冲剂，在生物(wù)制药、医疗诊断等领域有(yǒu)广泛应用(yòng)。

HEPES是一种两性离子缓冲剂，应用(yòng)于针对各种类型有(yǒu)机體(tǐ)的细胞培养基、蛋白质研究，还可(kě)用(yòng)于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里，因具有(yǒu)对细胞无毒性作用(yòng)且能(néng)長(cháng)时间控制恒定的pH范围等优点，常备用(yòng)作化妆品添加剂，起到活性剂、脱皮剂、促透剂等作用(yòng)。

HEPES和HEPES-Na的區(qū)别：HEPES-Na又(yòu)称有(yǒu)机HEPES碱，与HEPES是共轭酸碱的关系，两者本质上一样，不过两种物(wù)质溶解后的pH不同。

HEPES的制备方法：

关于HEPES缓冲溶液的配制,根据用(yòng)途配制,一种是单纯的HEPES＋NaOH,另一种是HEPES＋盐。各种配制方法总结如下：

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH（HEPES的有(yǒu)效pH 范围是6.8~8.2）,然后用(yòng)蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用(yòng)0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制

将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用(yòng)0.5M NaOH调节至所需pH值,再用(yòng)蒸馏水定容至100ml即可(kě)。

HEPES-Na的制备方法：

HEPES-Na可(kě)以通过4-羟乙基哌嗪与乙烯基磺酸钠合成，也可(kě)以采用(yòng)羟乙基磺酸、氢氧化钠及4-羟乙基哌嗪高压合成，目前符合生物(wù)缓冲剂要求的最广泛的制备方法是将HEPES与NaOH反应生成HEPES-Na。具體(tǐ)制备步骤如下：

氮气保护下将纯度在90-99%之间的HEPES和NaOH固體(tǐ)或溶液进行反应0.2-1小(xiǎo)时，反应温度為(wèi)20-100℃，反应完成后，将所得产物(wù)进行脱色、过滤、浓缩、除水、结晶、洗涤、干燥等操作，得到HEPES-Na。

这种制备方法工艺简单，操作方便，且所得HEPES-Na产物(wù)收率高，产品纯度高,可(kě)达到生物(wù)缓冲剂的纯度要求。

韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。
备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。