hepes缓冲液配制介绍

发布时间: 2021-05-29

在日常实验操作过程中使用(yòng)较為(wèi)频繁的就是缓冲液，但因其类型较多(duō)，像常见的有(yǒu)：磷酸盐、硼酸盐、Tris、HEPES等溶液，通常会根据实验要求来进行选择。这主要是因為(wèi)缓冲液的选择错误会造成实验结果的偏差，如使用(yòng)pH值相同的类型溶液，但因為(wèi)某种离子导致沉淀现象，就可(kě)能(néng)使实验产生不需要的化學(xué)反应，影响实验操作。由于hepes溶液近期使用(yòng)操作误區(qū)较多(duō)，所以下面就详细给大家介绍一下它。

作為(wèi)一种非离子型的两性溶液，其pH值在7.2-7.4之间，是大多(duō)数实验中的选择溶液，例如用(yòng)于生化诊断试剂盒和细胞培养液中。尤其是在开放式细胞培养中它可(kě)以较為(wèi)稳定的维持pH值，并对细胞无毒性作用(yòng)。

具體(tǐ)的配比详解如下：

1、以配制500毫升的HEPES，PH等于7的储备溶液為(wèi)例。首先准备119g的粉末溶解到400毫升的去离子水中，然后加入0.5-1M的氢氧化钠溶液，将其调节至所需要的pH值，再加入去离子水定容，在4度条件下保存即可(kě)。

2、如果是要在HEPES中加入少量盐，以500毫升為(wèi)例，其配比方法為(wèi)准备HEPES溶液6.5g,氯化钠8g,磷酸氢二钠七水合物(wù)0.19g,然后使用(yòng)0.5M的氢氧化钠溶液调节pH值，进行定容。

3、如果是2×HEPES缓冲盐溶液的配制，需按照氯化钠1.6g,氯化钾0.074g，磷酸氢二钠二水合物(wù)0.027g和1g的HEPES充分(fēn)溶解至90毫升的去离子水中，然后用(yòng)0.5M氢氧化钠溶液调节至所需pH值，再用(yòng)蒸馏水定容即可(kě)。

4、100 x HEPES贮存液配比為(wèi)取23g的HEPES溶于90ml双蒸水中，然后添加1M氢氧化钠溶液调节pH值到7.5-8.0，加去离子水定容至100ml，过滤除菌，在4℃或-20℃保存下保存即可(kě)。

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