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缓冲液不论是在有(yǒu)机化學(xué)还是无机化學(xué)中,其地位都是“尊贵”的。因為(wèi)在许多(duō)实验操作中进行反应都必须要求酸碱性保持在一个合理(lǐ)且稳定的范围内,而这些条件的实现就需要通过加入一定量的缓冲液才能(néng)达到。除了Tris、Tris-hcl、Caps等是多(duō)见的缓冲液,另外还有(yǒu)PB、PBS以及MOPS缓冲液也是常用(yòng)类型,那么这些缓冲液该如何配制呢(ne)?
一、PB与PBS缓冲液配制
PB与PBS是很(hěn)多(duō)实验室里用(yòng)到的溶液,像0.1mol/L的PB溶液可(kě)以用(yòng)于配制其它类型的固定液,而PBS就可(kě)以用(yòng)于一些漂洗组织标本以及稀释血清等,这两者的pH值在7.25-7.35之间。
1、PB磷酸盐缓冲液配制
进行配制时,首先会配制摩尔系数的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠,两者根据一定比例进行混合,即可(kě)得到PB溶液,如果是需要其它浓度的,也可(kě)根据实验要求进行配制使用(yòng)。
2、PBS缓冲溶液配制
首先称取一定克数的氯化钠和适量的PB,将其加入到容量瓶中,后加重蒸水,将其充分(fēn)摇晃均匀即可(kě)得到PBS,一般情况下如果配制的是0.2mol/L的PBSpH值较高,可(kě)以稀释成0.01mol/L,实验中进行灵活处理(lǐ)调整。
二、MOPS缓冲液配制
其又(yòu)被称為(wèi)丙磺酸缓冲液,可(kě)以充分(fēn)应用(yòng)到電(diàn)泳中,还可(kě)用(yòng)于RNA的分(fēn)离和转膜时的缓冲液。常用(yòng)的配制方法為(wèi):
1、称取精准数量的MOPS,将其溶解于DEPC处理(lǐ)水中;
2、使用(yòng)氢氧化钠调节pH值到7.0;
3、向溶液中加入经DEPC处理(lǐ)的乙酸钠和pH值為(wèi)8.0的EDTA;
4、将其定容至实验要求数值,然后使用(yòng)过滤膜去除杂质,在常温下避光保存即可(kě)。
缓冲液不论在科(kē)研还是医學(xué)工作中都有(yǒu)极其广泛的应用(yòng),使用(yòng)质量的好坏直接影响着研究工作的成果,所以大家在选择时一定要选择值得信赖的厂家。
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