Tris盐酸缓冲液用(yòng)于蛋白质SDS-PAGE電(diàn)泳

发布时间: 2023-08-22

Tris盐酸即三羟甲基甲胺-盐酸盐Tris-HCl缓冲液，适用(yòng)于大多(duō)数蛋白质、核酸相关的研究实验，通常用(yòng)它作為(wèi)缓冲液应用(yòng)在蛋白质SDS-PAGE電(diàn)泳实验中，電(diàn)泳效果好分(fēn)辨率高。

由Tris组成的生物(wù)缓冲液，常配成pH值為(wèi)6.8，7.4，8.0，8.8。其pH值随温度变化相对较大。一般来说，温度每升高一度，PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-PAGE最常用(yòng)的试剂。Tris可(kě)溶解核酸和蛋白质。

Tris盐酸缓冲液原料

SDS-PAGE是相当普遍的聚丙烯酰胺凝胶電(diàn)泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作為(wèi)支持介质的電(diàn)泳技术，适合蛋白质以及寡核苷酸的分(fēn)离。聚丙烯酰胺凝胶呈微观网状结构，具有(yǒu)分(fēn)子筛效应，分(fēn)為(wèi)非变性聚丙烯酰胺凝胶電(diàn)泳（Native-PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）两种形式。

在蛋白质SDS－PAGE不连续電(diàn)泳实验中，制胶缓冲液使用(yòng)的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH值6.7，分(fēn)离胶pH為(wèi)8.9；而電(diàn)泳缓冲液使用(yòng)的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩電(diàn)泳凝胶中，其pH值呈弱酸性，因此甘氨酸只有(yǒu)很(hěn)少量的会解离，其在電(diàn)场的作用(yòng)下，泳动效率低；而氯离子却很(hěn)高，两者之间形成导電(diàn)性较低的區(qū)带，蛋白分(fēn)子就介于二者之间泳动。由于导電(diàn)性与電(diàn)场强度成反比，这一區(qū)带便形成了较高的電(diàn)压梯度，压着蛋白质分(fēn)子聚集到一起，浓缩為(wèi)一狭窄的區(qū)带。

当样品进入分(fēn)离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分(fēn)离胶孔径的缩小(xiǎo)，在電(diàn)场的作用(yòng)下，蛋白分(fēn)子根据其固有(yǒu)的带電(diàn)性和分(fēn)子大小(xiǎo)进行分(fēn)离。

所以，pH对整个反应體(tǐ)系的影响是至关重要的，实验中在排除其他(tā)因素之后仍不能(néng)很(hěn)好解决问题的情况，应首要考虑该因素，当然其他(tā)的因素也可(kě)以从多(duō)方面考虑。

Tris盐酸由Tris与盐酸混合制得，像氨基丁三醇、缓血酸胺、2-氨基-2-（羟甲基）-1,3-丙二醇等都是指的Tris，是韵邦生产的重要原料，还可(kě)以用(yòng)于其它各种缓冲液體(tǐ)系。