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通常用(yòng)于小(xiǎo)分(fēn)子分(fēn)离纯化和分(fēn)析检测的 Chromatography 习惯叫色谱,而用(yòng)于生物(wù)大分(fēn)子分(fēn)离纯化的 Chromatography 叫层析。常用(yòng)小(xiǎo)分(fēn)子分(fēn)离模式主要有(yǒu)正相色谱、反相色谱、Hilic、和手性色谱;常用(yòng)生物(wù)大分(fēn)子分(fēn)离模式的主要有(yǒu)分(fēn)子筛(凝胶过滤)、疏水、离子交换等。
1 新(xīn)型分(fēn)离材料的出现促进色谱分(fēn)离技术的进步
色谱或层析分(fēn)离效果很(hěn)大程度上取决于色谱填料和层析介质,高性能(néng)新(xīn)型色谱填料及层析介质的不断出现是液相色谱和层析分(fēn)离和分(fēn)析技术发展的有(yǒu)效驱动力,也是色谱和层析研究中最丰富、最富有(yǒu)活力、最具有(yǒu)创造性的研究方向之一。
2 主要色谱填料的种类及其特点
色谱分(fēn)离材料主要有(yǒu)三大类:第一类是以多(duō)孔二氧化硅(硅胶)為(wèi)代表的无机化合物(wù)色谱填料;第二类是以琼脂糖、葡聚糖為(wèi)代表的改性碳水高分(fēn)子层析介质(软胶);第三类是以交联聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸酯為(wèi)代表的合成高分(fēn)子聚合物(wù)色谱填料和层析介质。
>> 硅胶色谱填料——小(xiǎo)分(fēn)子分(fēn)离纯化和分(fēn)析检测首选填料
硅胶及键合硅胶色谱填料因具有(yǒu)良好的机械强度、耐溶剂性、可(kě)控的比表面积和孔径大小(xiǎo)、不溶胀和不可(kě)压缩性、及表面富含易于键合或改性的硅羟基等优点,使得硅胶成為(wèi)高效色谱填料应用(yòng)历史最悠久、最广泛的高效液相色谱填料之一。但硅胶在酸碱条件下不稳定的缺点使其不适合用(yòng)于在碱性条件下分(fēn)离,因此硅胶很(hěn)少用(yòng)于生物(wù)大分(fēn)子的分(fēn)离纯化。
>> 多(duō)糖基软胶层析介质——生物(wù)大分(fēn)子分(fēn)离纯化的开拓者
天然碳水高分(fēn)子(主要是琼脂糖和葡聚糖)改性填料具有(yǒu)亲水强,生物(wù)兼容性好,能(néng)减少对生物(wù)分(fēn)子的非特异性吸附等特点,在分(fēn)离过程中容易保持生物(wù)分(fēn)子的生物(wù)活性而被广泛地用(yòng)于生物(wù)大分(fēn)子的分(fēn)离纯化过程中。但天然碳水改性高分(fēn)子介质机械强度差、溶胀體(tǐ)积大、流速慢等,被称為(wèi)软胶;另外大分(fēn)子在这种介质的传递速度慢,在高流速条件下载量低,因此极大地限制了生物(wù)分(fēn)离纯化的生产效率。