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利用(yòng)化學(xué)发光法达到实验检测目的成為(wèi)了很(hěn)多(duō)实验人员的常规操作,其中将发光和分(fēn)析法两者联合起来,具有(yǒu)其它发光试剂不可(kě)比拟的优势。而反应过程就是通过发光试剂,如鲁米诺、吖啶酯或碱性磷酸酶等来与抗體(tǐ)抗原标记,待测物(wù)质与标记后的抗原经过反应后,然后进行测定发光强度,就可(kě)知道待测物(wù)质的含量。
不过这需要注意化學(xué)发光试剂的质量,像吖啶酯和碱性磷酸酶是使用(yòng)较多(duō)的试剂,但也有(yǒu)人会质疑这两种试剂,到底哪一种好呢(ne)?其实这主要和它们的性能(néng)分(fēn)不开。下面具體(tǐ)给大家分(fēn)析一下。
在发光體(tǐ)系中有(yǒu)直接发光也有(yǒu)间接发光,前者是直接利用(yòng)发光分(fēn)子达到实验要求,例如吖啶酯。而后者具有(yǒu)代表性的就是酶促发光,利用(yòng)试剂就有(yǒu)碱性磷酸酶与抗體(tǐ)抗原进行偶联,待产生免疫反应后,通过酶催化底物(wù)发光。
从发光形式上来看,吖啶酯和碱性磷酸酶就存在很(hěn)大的差异性: 吖啶酯在过氧化氢溶液和氢氧根的反应下水解发光,其发光在0.5秒(miǎo)时就可(kě)以达到高峰,1秒(miǎo)以内可(kě)以发光完成,属于闪光型,并且对于各项检测仪器要求很(hěn)高,要求在1秒(miǎo)内完成读数。
碱性磷酸酶是酶底物(wù)发光,一旦进入发光平台,可(kě)以持续进行发光,但是其劣势就是需要进行孵育反应一段时间以后,其发光才能(néng)达到峰值,与吖啶酯1秒(miǎo)的发光时间比较而言,发光速度上会有(yǒu)限制。
所以从上面两个角度来看,吖啶酯的优势显而易见,它也是大多(duō)数公司的选择,这样不仅可(kě)以保证灵敏度,且有(yǒu)效提高检测速度。
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