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关于病毒采样管和病毒保存液

发布时间: 2022-04-15

病毒采样管:

拭子:咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液 

 

采样管:采样时使用(yòng)的无RNA酶的储存管 

 

病毒保存液:原理(lǐ)-裸露RNA,保护好RNA,防止其裂解,病毒蛋白灭活丧失感染性 

 

 

基础改良的病毒保存液:

病毒生存需求:Eagle's基础培养液(MEM)或Hank’s平衡盐,或HEPES缓冲盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用(yòng)酚红钠盐做為(wèi)指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色

 

稳定病毒的蛋白质外壳:保存液中添加了必须的葡萄糖。L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有(yǒu)胎牛血 清或牛血清白蛋白,可(kě)以稳定病毒的蛋白质外壳 

 

抑制细菌组分(fēn):由于保存液营养成分(fēn)丰富,有(yǒu)利于病毒的成活但是也有(yǒu)利于细菌的生長(cháng),如果保存液中污染了细菌,则会大量敏殖,其代謝(xiè)产物(wù)中的二氧化碳会使保存药pH值下降,从粉红色变為(wèi)黄色,因而大多(duō)数家都在配方中添加了抑菌剂成分(fēn),推荐使用(yòng)的抑菌剂為(wèi)青霉素、链霉素、庆大置素及多(duō)粘菌素B等,不推荐使田善氨钠、2-甲基-4-显噻唑啉-3-酮(MCI和5-氯-2-甲基-4-显噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因為(wèi)这些组分(fēn)对PCR反应有(yǒu)影响,由于这种保存液提供的样木(mù)基本是活病毒,可(kě)以最大程度保持样木(mù)的原始性,后续不仅可(kě)以用(yòng)于病毒的核酸提取检测,还能(néng)用(yòng)于病毒的培养和分(fēn)离。但是用(yòng)于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取化。