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细胞培养基是给细胞提供营养促进生長(cháng)的基础物(wù)质,也是培养细胞的重要的生長(cháng)环境因素,细胞培养基中通常含有(yǒu)PH调整液、平衡盐水、细胞消化液、抗生素溶液等。那什么情况下细胞培养基中需要添加HEPES呢(ne)?它又(yòu)起到什么作用(yòng)?我们一起来了解下。
1、HEPES在细胞培养基中的作用(yòng)
大家都知道HEPES是一种生物(wù)缓冲剂,所以它在细胞培养基的重要组成因素中当然是PH调整液了。因為(wèi)培养基中需要保持足够的碳酸氢盐以达到获取营养目的,这就需要HEPES提供额外的缓冲能(néng)力,HEPES缓冲介质可(kě)抵抗急剧的pH变化,但不能(néng)完全阻止pH的变化。值得注意的是,在使用(yòng)HEPES缓冲剂时一定配置成合适的使用(yòng)浓度,否则浓度过高会引发细胞毒性,影响整个实验。
2、可(kě)以使用(yòng)别的缓冲剂代替HEPES吗?
虽然市面上其它的生物(wù)缓冲剂种类很(hěn)多(duō),但是由于多(duō)数细胞培养的生長(cháng)环境PH區(qū)间值保持在7.2-7.4之间比较好,而这又(yòu)刚好在HEPES缓冲剂的有(yǒu)效缓冲范围之内,所以与其它缓冲剂相比,HEPES无疑是具有(yǒu)优势的。但是根据自己的实验需求,也可(kě)以酌情选择别的缓冲液使用(yòng)。 上述对HEPES在细胞培养基中的作用(yòng)做了详细说明。HEPES除了用(yòng)于细胞培养之外,还广泛用(yòng)于组织培养,蛋白质纯化和提取,免疫沉淀,细胞裂解,活细胞成像和其他(tā)生物(wù)/生化研究等。
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