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1,3-双(三(羟甲基)甲氨基)丙烷,简称BIS-TRIS,它是TRIS缓冲剂的衍生物(wù),也是一种高效螯合PH缓冲剂。Bis-Tris可(kě)以识别在细胞蛋白质中最容易受到铅离子竞争的钙离子结合位点。
Bis-Tris缓冲液
正二价铅离子是一种异生金属离子,暴露的铅离子对环境,人體(tǐ)都有(yǒu)一定的危害。幼儿接触后会造成急性或慢性中毒,甚至会产生不可(kě)逆转的神经损伤。所以找到对铅离子攻击脆弱的蛋白结合位点至关重要。在 MES 缓冲液等非螯合环境中,鉴定这些蛋白质上生理(lǐ)相关的铅离子结合位点具有(yǒu)挑战性,因為(wèi)铅离子相互作用(yòng)既可(kě)以是特异性的,也可(kě)以是机会性的,并且通常表现出比天然金属离子更高的亲和力。
螯合剂 Bis-Tris 可(kě)用(yòng)来探测高亲和力铅离子位点并确定其特定功能(néng)作用(yòng)。Bis-Tris 有(yǒu)五个羟基和一个叔胺基,所有(yǒu)这些都可(kě)能(néng)作為(wèi)多(duō)种二价金属离子的配體(tǐ)。Bis-Tris与 EDTA 等其他(tā)强螯合剂相比,它与铅离子形成较弱但稳定的络合物(wù)。此外,Bis-Tris 是一种高度适应性的螯合剂,因為(wèi)其参与金属离子配位的官能(néng)团数量可(kě)能(néng)会因所提供的竞争配體(tǐ)的存在而异,例如,通过蛋白质、脂质或其他(tā)小(xiǎo)分(fēn)子。使用(yòng) Bis-Tris 不仅能(néng)够區(qū)分(fēn)高亲和力和低亲和力铅离子位点。在金属结合研究中使用(yòng)螯合 pH 缓冲液Bis-Tris可(kě)以為(wèi)金属蛋白的机制提供有(yǒu)价值的见解。Bis-Tris 不仅不影响铅离子与高亲和力位点的结合,还為(wèi)蛋白质结合的金属离子提供了额外的配體(tǐ)。但非螯合 MES 缓冲液与结合位点有(yǒu)弱相互作用(yòng)。从铅离子毒性的角度来看,在 Bis-Tris 类螯合剂和代謝(xiè)物(wù)丰富的细胞环境中,铅离子复合物(wù)的膜相互作用(yòng)不太可(kě)能(néng)发生。
除了在金属铅方面的应用(yòng),Bis-Tris缓冲剂的其它应用(yòng)也很(hěn)广泛。
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