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3-吗啉丙磺酸,简称為(wèi)MOPS,是生物(wù)化學(xué)和分(fēn)子生物(wù)學(xué)中常用(yòng)的一种两性离子缓冲试剂,MOPS本身属于Good’s缓冲剂,不仅可(kě)以用(yòng)作细胞培养基的缓冲體(tǐ)系,而且是常见的電(diàn)泳缓冲液和蛋白纯化色谱缓冲液。
MOPS可(kě)用(yòng)于哪些实验?
1.作為(wèi)電(diàn)泳中的运行缓冲液和用(yòng)于色谱中的蛋白质纯化;
2.配制成多(duō)种琼脂培养基,用(yòng)于细菌,酵母和哺乳动物(wù)细胞的培养。但是,高于20mM的浓度不建议用(yòng)于哺乳动物(wù)细胞;
3.可(kě)用(yòng)作大肠杆菌细胞的裂解缓冲液;
4.作為(wèi)凝胶过滤色谱中的洗脱液;
5.应用(yòng)于Northern杂交,作為(wèi)RNA的分(fēn)离和转膜时的缓冲液;
6.适用(yòng)于二喹啉甲酸(BCA)测定;
7.用(yòng)于叶绿體(tǐ)薄层备样的電(diàn)子传递和磷酸化研究。
8.可(kě)用(yòng)于生化诊断试剂盒,比如DNA/RNA提取试剂盒、PCR试剂盒、测定肌酐的试剂盒等。
MOPS运输和保存
MOPS粉末可(kě)于室温保存数年。不过一经静置,散装粉末可(kě)能(néng)聚集在一起,形成硬块,但是不会影响其化學(xué)性质。MOPS溶液可(kě)于2-8℃保存至少6个月,用(yòng)0.2 μm滤膜过滤除菌,不建议高压灭菌。如需配制无核酸酶的MOPS溶液,可(kě)先对水进行高压灭菌后,再加入粉末溶解
MOPS缓冲剂的特点
(1)在水溶液中有(yǒu)良好的溶解性,水溶液无色透明;
(2)在化學(xué)上稳定,对生物(wù)没有(yǒu)毒性且对生物(wù)膜无明显的渗透作用(yòng);
(3)酸碱解离常数(pKa值)稳定,一般在6-8,释放质子的能(néng)力稳定,且受离子浓度、溶液组成和温度的影响较小(xiǎo);
(4)不是生化反应系列的代謝(xiè)物(wù)、激活剂或者抑制剂,也不是酶的底物(wù),即与多(duō)种酶和化學(xué)试剂不发生反应,用(yòng)于组织培养、病毒诊断等试验时,细胞表现出较高的生命力。
(5)在紫外波实际上无特征吸收,在波長(cháng)小(xiǎo)于230-240nm时才有(yǒu)微弱的吸收,因而不干扰通常的光度法测量。
(6)对阳离子无络合能(néng)力或者微弱的络合能(néng)力;
两性离子缓冲液具有(yǒu)诸多(duō)优点、应用(yòng)广泛,市场需求大,已被广泛生产。
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