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在缓冲液中Tris-HCl与HEPES都是应用(yòng)比较普遍的。為(wèi)什么把它们两个拿(ná)出来对比,这也是為(wèi)了很(hěn)好的让大家了解到更多(duō)相关信息,以便在采購(gòu)和使用(yòng)过程中更准确。
1、Tris-HCl缓冲液
Tris缓冲液是在生物(wù)化學(xué)研究中使用(yòng)较广泛的一种缓冲剂,其本身為(wèi)弱碱,常用(yòng)有(yǒu)效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。
1)Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强,可(kě)以只用(yòng)这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;对生物(wù)化學(xué)过程干扰很(hěn)小(xiǎo),不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
2)Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1
温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4
2、HEPES缓冲液
HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有(yǒu)较好的缓冲能(néng)力,常用(yòng)在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
1)HEPES缓冲液优点:
在开放式培养或Cells观察时能(néng)维持较恒定的pH值,并对Cells伤害性作用(yòng)。
2)HEPES缓冲液缺点:
在高浓度时对一些Cells可(kě)能(néng)有(yǒu)毒,与其他(tā)缓冲剂相比价格略贵。
Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的应用(yòng)
1、Tris-HCl缓冲液
Tris是蛋白质電(diàn)泳缓冲液的主要成分(fēn)之一,其在電(diàn)泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲體(tǐ)系,稳定電(diàn)泳过程中的PH。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物(wù)的中间物(wù)。Tris也被用(yòng)作滴定标准物(wù)。作為(wèi)蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用(yòng)Tris,换成其他(tā)质谱仪可(kě)耐受的缓冲液。
2、HEPES缓冲液
HEPES缓冲液对Cells伤害性作用(yòng),它是一种氢离子缓冲剂,能(néng)较長(cháng)时间控制恒定的pH范围。使用(yòng)时浓度為(wèi)10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可(kě)达到缓冲能(néng)力。它还用(yòng)于环境,分(fēn)析和生物(wù)學(xué)研究;作為(wèi)阳离子交换层析中的结合缓冲液和洗脱液;作為(wèi)凝胶電(diàn)泳中的运行缓冲液等。
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