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HEPES是一种用(yòng)于细胞培养的缓冲试剂,它的缓冲范围是6.8-8.2之间,在开放式的细胞培养条件中,它的PH值常常会受到外界的影响,如若加入HEPES缓冲剂,即可(kě)防止培养基内pH氧化升高,所以在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。除此之外在有(yǒu)机分(fēn)子摄取、氧化应激机制的改变或离子的抑制中使用(yòng)也很(hěn)广泛。
HEPE的缓冲液,与碳酸氢盐相比,它溶解度更高更稳定的,并且与金属离子的络合最小(xiǎo),在不同的使用(yòng)情况下证明HEPES可(kě)以负责生物(wù)技术的重大修改有(yǒu)机分(fēn)子的吸收等参数,对氧化应激机制和离子通道抑制目前已有(yǒu)几种分(fēn)子机制。
朊病毒又(yòu)称朊粒、蛋白质侵染因子、毒朊或感染性蛋白质,是一类能(néng)侵染动物(wù)并在宿主细胞内复制的小(xiǎo)分(fēn)子无免疫性疏水蛋白质。在我们实验室寻求朊病毒基因治疗方法的过程中,我们使用(yòng)含有(yǒu)相关蛋白的HEK 293T上清液朊病毒感染细胞上的慢病毒,在对照实验中,单独使用(yòng)无关的慢病毒或培养基观察到一个显着的抑制作用(yòng)的积累朊蛋白(PrPSc)的异常亚型最终确认与培养基中HEPE的存在有(yǒu)关。
当在朊病毒感染的细胞上使用(yòng)添加HEPES的细胞培养基时,有(yǒu)一个显著的浓度依赖性抑制的积累,朊蛋白异常亚型(PrPSc)。这种效应只存在于活细胞中,并且没有(yǒu)被证实被认為(wèi)与PrP环境或生物(wù)學(xué)的改变有(yǒu)关。HEPES的这种抑制作用(yòng)也可(kě)以用(yòng)来防止细胞培养中朊病毒的污染或繁殖。
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