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在電(diàn)泳实验中,会用(yòng)到缓冲剂来维持電(diàn)泳稳定系统恒定PH值的必要条件,因為(wèi)在電(diàn)泳实验时它的正极与负极会发生電(diàn)解反应,正极会发生氧化反应,负极会发生还原反应。長(cháng)时间的電(diàn)泳会使正极变酸,负极变碱。而缓冲液能(néng)使溶液两极的pH保持基本不变。还会使溶液具有(yǒu)一定的导電(diàn)性,有(yǒu)利于DNA分(fēn)子的迁移。
说到这里很(hěn)多(duō)人都想到了生物(wù)缓冲液MOPS 3-吗啉丙磺酸,它属于Good’s缓冲剂,在水中有(yǒu)良好的溶解性,缓冲范围在6.5-7.9之间,可(kě)作為(wèi)二维凝胶電(diàn)泳中等電(diàn)聚焦電(diàn)泳(IEF)的電(diàn)解质系统成分(fēn);还可(kě)应用(yòng)于Northern杂交,作為(wèi)RNA的分(fēn)离和转膜时的缓冲液。
電(diàn)泳缓冲中 常用(yòng)的10×MOPS Buffer配制方法如下:
(1)称量41.8 g MOPS,溶解于约700mL DEPC处理(lǐ)水中;
(2)使用(yòng)2 N NaOH 调节pH值至7.0;
(3)向溶液中加入DEPC处理(lǐ)的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL;
(4)定容至1 L,用(yòng)0.45 μm 滤膜过滤除去杂质,室温避光保存。
除了MOPS缓冲液之外用(yòng)于電(diàn)泳中的生物(wù)缓冲剂还有(yǒu)许多(duō),它们之间也有(yǒu)一定的區(qū)别,适用(yòng)于各种電(diàn)泳中。而在现在的市场上,生物(wù)缓冲剂的商(shāng)家众多(duō),产品规格与质量参差不齐。
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