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行业新(xīn)闻
关键词：生物(wù)缓冲剂、HEPES、4-羟乙基哌嗪乙磺酸 HEPES中文(wén)全称 4-羟乙基哌嗪乙磺酸，CAS号為(wèi)：7365-45-9，pH 缓冲范围6.8 - 8.2 ，在25℃下，其pKa 值為(wèi)7.5。HEPES-Na即N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)钠盐，其CAS号為(wèi)75277-39-3。HEPES和HEPES-Na都是非常重要的生物(wù)缓冲剂，在生物(wù)制药、医疗诊断等领域有(yǒu)广泛应用(yòng)。 HEPES是一种两性离子缓冲剂，应用(yòng)于针对各种类型有(yǒu)机體(tǐ)的细胞培养基、蛋白质研究，还可(kě)用(yòng)于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里，因具有(yǒu)对细胞无毒性作用(yòng)且能(néng)長(cháng)时间控制恒定的pH范围等优点，常备用(yòng)作化妆品添加剂，起到活性剂、脱皮剂、促透剂等作用(yòng)。 HEPES和HEPES-Na的區(qū)别：HEPES-Na又(yòu)称有(yǒu)机HEPES碱，与HEPES是共轭酸碱的关系，两者本质上一样，不过两种物(wù)质溶解后的pH不同。 HEPES的制备方法： 关于HEPES缓冲溶液的配制,根据用(yòng)途配制,一种是单纯的HEPES＋NaOH,另一种是HEPES＋盐。各种配制方法总结如下： 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制 119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH（HEPES的有(yǒu)效pH 范围是6.8~8.2）,然后用(yòng)蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。 二、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml） HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用(yòng)0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。 三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制 将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用(yòng)0.5M NaOH调节至所需pH值,再用(yòng)蒸馏水定容至100ml即可(kě)。 HEPES-Na的制备方法： HEPES-Na可(kě)以通过4-羟乙基哌嗪与乙烯基磺酸钠合成，也可(kě)以采用(yòng)羟乙基磺酸、氢氧化钠及4-羟乙基哌嗪高压合成，目前符合生物(wù)缓冲剂要求的最广泛的制备方法是将HEPES与NaOH反应生成HEPES-Na。具體(tǐ)制备步骤如下： 氮气保护下将纯度在90-99%之间的HEPES和NaOH固體(tǐ)或溶液进行反应0.2-1小(xiǎo)时，反应温度為(wèi)20-100℃，反应完成后，将所得产物(wù)进行脱色、过滤、浓缩、除水、结晶、洗涤、干燥等操作，得到HEPES-Na。 这种制备方法工艺简单，操作方便，且所得HEPES-Na产物(wù)收率高，产品纯度高,可(kě)达到生物(wù)缓冲剂的纯度要求。 韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。 备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。
TRIS全称三羟甲基氨基甲烷，CAS号是77-86-1，外观為(wèi)白色结晶粉末，水溶性好，可(kě)以溶于乙醇、乙酸乙酯、苯以及水，不溶于乙醚、四氯化碳，并且对铜、铝有(yǒu)腐蚀作用(yòng)。作為(wèi)生物(wù)缓冲剂和酸量滴定法基准物(wù)质使用(yòng)时，纯度要求较高。不过目前，基准级的三羟甲基氨基甲烷的制备还不是特别完善。常用(yòng)的方法是将工业级三羟甲基氨基甲烷溶于蒸馏水中，经多(duō)次重结晶后制得基准级三羟甲基氨基甲烷。此种方法在生产公斤级批量的产品时存在工艺复杂、产量小(xiǎo)、均匀性差、成本高等不足，且浓缩过程中因温度过高造成物(wù)料变色或分(fēn)解，导致产品合格率降低。 三羟甲基氨基甲烷的合成工艺： 1、三羟甲基氨基甲烷的制备方法：将三羟甲基甲烷加入甲醇水溶液中，加热至50-70℃搅拌溶解，其中，所述三羟甲基甲烷与甲醇水溶液的质量體(tǐ)积比按g/ml计為(wèi)8:3-7，所述甲醇水溶液為(wèi)纯净水和甲醇按照體(tǐ)积比2:3混合配制而成；向溶液中加入木(mù)炭活性炭，其中，所述木(mù)炭活性炭与三羟甲基甲烷的重量比為(wèi)0.5-2:100，于45-55℃保温20-40分(fēn)钟后趁热过滤，收集滤液；将滤液进行减压浓缩，浓缩温度70-80℃，至出现结晶，放冷静置；用(yòng)抽滤方法将结晶分(fēn)离后，用(yòng)无水乙醇淋洗，放置于40-60℃干燥3-5小(xiǎo)时即可(kě)。 2、三羟甲基氨基甲烷的合成方法：它是用(yòng)硝基甲烷和过量多(duō)聚甲醛為(wèi)主要原料，在一定温度下缩合反应成三羟甲基硝基甲烷；再在一定温度、压力、溶剂和催化剂下，通过加氢还原反应，经结晶，重结晶制成三羟甲基氨基甲烷。 韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。 备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。
琼脂糖预制胶電(diàn)泳试剂盒是一种非常适合核酸PCR实验、酶切反应实验等的一种可(kě)以直接进行核酸凝胶電(diàn)泳实验的试剂盒，電(diàn)泳实验效率大大提高，可(kě)以节约大量时间。 此款琼脂糖電(diàn)泳试剂盒跟其它琼脂糖试剂盒有(yǒu)區(qū)别，因此使用(yòng)方法也有(yǒu)一些區(qū)别，不需要再四处采購(gòu)琼脂糖、核酸染料、電(diàn)泳液和loading buffer等试剂；而且琼脂糖预制胶是经过核酸染料预染的，既不用(yòng)进行繁琐的制胶，也不用(yòng)電(diàn)泳液染色或后染色，即开即用(yòng)；再加上配备的高压快速電(diàn)泳液，電(diàn)泳速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)快与传统的TAE或TBE電(diàn)泳液。 使用(yòng)方法： 在低温条件下高压快速電(diàn)泳有(yǒu)时会有(yǒu)结晶析出，请65℃水浴加热溶解，用(yòng)去离子水稀释100倍，用(yòng)作電(diàn)泳液，倒入電(diàn)泳槽中。本产品配置的電(diàn)泳液可(kě)重复使用(yòng)两三次，如果大電(diàn)泳槽次数更多(duō)。 取出琼脂糖凝胶，剪刀(dāo)剪开，标签面即孔突出面朝上，公测端為(wèi)负极，放入高压快速電(diàn)泳液中，没过胶面1mm，如有(yǒu)孔内有(yǒu)气泡，设法除去。 在DNA样品中加入1µl的6× loading buffer混匀，用(yòng)移液器将混合液缓慢加入凝胶加样孔，同时加入Marker。 开启電(diàn)源，红色為(wèi)正极，黑色為(wèi)负极，注意DNA样品有(yǒu)负极向正极電(diàn)泳移动。 根据迁移距离及指示剂迁移的位置，判断是否终止電(diàn)泳。 電(diàn)泳完毕，关電(diàn)源，将凝胶放在成像仪中观察電(diàn)泳条带及其位置，并与Marker比较被扩增产物(wù)的大小(xiǎo)。 韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。 备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。
生物(wù)缓冲液是一种能(néng)在加入少量酸或碱时保持溶液的pH值相对稳定的溶液，多(duō)数细胞仅能(néng)在很(hěn)窄的pH范围内进行活动，需要有(yǒu)缓冲體(tǐ)系来抵抗在代謝(xiè)过程中出现的pH变化。在生化研究工作中，常常要用(yòng)到缓冲溶液来维持实验體(tǐ)系的酸碱度。生物(wù)缓冲液的种类多(duō)，用(yòng)途广，需根据实际应用(yòng)选择合适的體(tǐ)系。 PB缓冲液（磷酸盐缓冲液） 磷酸盐缓冲液又(yòu)称PB缓冲液，是应用(yòng)很(hěn)广泛的缓冲液。由于其二次离解作用(yòng)，缓冲液pH值范围较宽，可(kě)配置不同pH值的酸性、碱性和中性缓冲液。 PB缓冲液的优点： ①易于配制成各种浓度 ； ②pH值范围宽； ③pH受温度的影响小(xiǎo)。 PB缓冲液的缺点： ①易与常见的钙、镁、重金属离子形成沉淀； ②抑制某些生化过程。 Tris缓冲液 Tris缓冲液在生物(wù)化學(xué)研究中有(yǒu)着广泛的应用(yòng)。它是弱碱，通常在“中性”范围内使用(yòng)。 Tris缓冲液的优点： ①因為(wèi)Tris碱的碱性较强，所以可(kě)以只用(yòng)这一种缓冲體(tǐ)系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液； ②对生物(wù)化學(xué)过程干扰很(hěn)小(xiǎo)，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。 Tris缓冲液的缺点： ①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1； ②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很(hěn)大，所以一定要在使用(yòng)温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能(néng)用(yòng)于0℃～4℃； ③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封； ④它对某些pH電(diàn)极发生一定的干扰作用(yòng)，所以要使用(yòng)与Tris溶液具有(yǒu)兼容性的電(diàn)极。 甘氨酸缓冲液 甘氨酸缓冲液pH值范围广，应用(yòng)范围广。pH值范围為(wèi)2.0~11.0。最常见的體(tǐ)系和pH值范围如下表所示： 甘氨酸缓冲液 pH值范围 甘氨酸-HCl 2.0~5.0 甘氨酸-NaOH 8.0~11.0 甘氨酸-Tris 8.0~11.0 甘氨酰胺缓冲液 7.8~8.8 甘氨酰甘氨酸缓冲液 8.0~9.0 甘氨酸缓冲液的优点：為(wèi)细胞成分(fēn)和各种提取物(wù)提供更亲近的自然环境。 甘氨酸缓冲液的缺点：类似于磷酸盐缓冲體(tǐ)系；干扰某些生化反应过程，例如代謝(xiè)过程。 韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。 备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。
吖啶酯是一种可(kě)用(yòng)作化學(xué)发光标记物(wù)的化學(xué)物(wù)质，吖啶盐和相关化合物(wù)已被广泛证明為(wèi)非常有(yǒu)用(yòng)的化學(xué)发光标记物(wù)，其稳定性、标记特异性和检测灵敏度都超越放射性同位素。在碱性条件下，NHS 作為(wèi)离去基团被取代，蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。但是，吖啶酯只是吖啶盐的一个总称，若细分(fēn)下来，德晟总共能(néng)提供7种不同的的吖啶酯（见下表）供各位选择，那么究竟这7中吖啶酯有(yǒu)什么异同点呢(ne)？让我们继续向下看。 利用(yòng)吖啶酯的磁微粒化學(xué)发光法 吖啶酯大致种类： 1.1 吖啶酯0号-吖啶酯（AE-NHS ） 【CAS】无 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】N/A 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.2 吖啶酯1号-吖啶酯（DMAE-NHS） 【英文(wén)名】2',6'-dimethyl-4'-(N-succinimidyloxycarbonyl)phenyl-10-methyl-acridinium-9-carboxylate methosulfate 【中文(wén)名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2,6-二甲基苯氧基]羰基]-10-甲 基吖啶硫酸甲酯盐 【CAS】115853-74-2 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】594.13，C29H26N2O10S 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.3 吖啶酯2号-吖啶酯（Me-DMAE-NHS） 【英文(wén)名】2',6'-Dimethylcarbonylphenyl 10-Methyl-9-acridinecarboxylate 4'-NHS Ester Triflate 【中文(wén)名】2',6'-二甲基羰基苯基10-甲基-9-吖啶甲酸酯4'-NHS酯三氟甲基磺酸盐 【CAS】无（115853-74-2, DMAE-NHS类似物(wù)） 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】632.56，C29H23F3N2O9S 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.4 吖啶酯3号-吖啶酯（NSP-DMAE-NHS） 【英文(wén)名】2',6'-DiMethylcarbonylphenyl-10-sulfopropylacridinium-9-carboxylate 4'- NHS Ester 【中文(wén)名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2,6-二甲基苯氧基]羰基]-10-(3- 磺基丙基)-吖啶内盐 【CAS】194357-64-7 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】590.6，C30H26N2O9S 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.5 吖啶酯4号-吖啶盐(NSP-SA) 【英文(wén)名】3-[9-(((3-(carboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt 【中文(wén)名】吖啶盐(NSP-SA) 【CAS】211106-69-0 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】584.66，C28H28N2O8S2 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.6 吖啶酯5号-吖啶盐(NSP-SA-NHS) 【英文(wén)名】3-[9-(((3-(N-succinimidyloxycarboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt 【中文(wén)名】吖啶盐(NSP-SA-NHS) 【CAS】199293-83-9 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】681.73，C32H31N3O10S2 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 1.7 吖啶酯6号-吖啶酰肼(NSP-SA-ADH) 【CAS】无 【外观】黄色固體(tǐ)或粉末 【纯度】≥98% 【分(fēn)子量】740.85，C34H40N6O9S2 【存储条件】-20℃，避光 【运输条件】48小(xiǎo)时内可(kě)室温（20-25℃）运输，超过48小(xiǎo)时需要在-20℃条件下运输 二．吖啶酯的结构區(qū)别 六种吖啶酯，其中 1～3 号為(wèi)吖啶酯类；4～6 号為(wèi)吖啶磺酰胺内盐；1～4 号為(wèi) NHS 活性酯；5 号為(wèi)吖啶 羧酸，含羧基；6 号為(wèi)吖啶酰肼，含有(yǒu)游离氨基。 三．抗水解性能(néng)与稳定性 传统吖啶酯 0 号（AE-NHS），1～3 号在其结构上进行了修饰，增大了位阻，增强了抗水解性。0 号只在 酸性溶液中稳定，当 pH 值大于 6.3 后易水解，而 1～3 号则不然，如在室温下，在 pH 為(wèi) 7.0 的 PB 缓冲液中很(hěn) 稳定，16 天后，发光活性只降低 3.6％。 4～6 号则是引入了磺酰胺基团，其稳定性较吖啶酯类（0～3 号）高, 其原因是由于 C-N 键与 C-O 键的 键级不同，C-N 键大于 C-O 键。吖啶酰胺类化合物(wù)（4～6 号）抵抗水解的能(néng)力也强于吖啶酯类（0～3 号）化合 物(wù)。4～6 号在酸性溶液中(pH
Tris全称：三羟甲基氨基甲烷，作為(wèi)一种常用(yòng)的化工品在各大领域都有(yǒu)着十分(fēn)广泛的应用(yòng)。例如在医药、日化品、特殊材料等等领域都能(néng)看到Tris的身影，而在其中有(yǒu)一种应用(yòng)，”核酸纯化”。核酸纯化则需要饱和酚，Tris也有(yǒu)饱和酚，也称為(wèi)碱性酚、Tris平衡酚。Tris饱和酚是用(yòng)是用(yòng)Tris-ClpH8.0饱和过的重蒸酚，為(wèi)浅黄色透明液體(tǐ)，有(yǒu)刺激性气味，上层為(wèi)Tris盐酸缓冲液，溶液内加有(yǒu)抗氧化的8-羟基喹啉。适用(yòng)于从核酸样品中去除蛋白质，提取DNA等。虽然现在市面上有(yǒu)现成产品售卖，但是掌握着Tris饱和酚的配置方法还是要好一些。 Tris饱和酚的详细配置步骤。 Tris饱和酚： 1、冰箱取出重蒸酚，室温放置－－－68度水浴溶化，切勿立即放入68度的水浴中，以防玻璃炸裂； 2、加8－羟基喹啉至0.1％和β－巯基乙醇至0.2％，（原液14. 4MOL/ML），混匀，溶液呈现黄色，倒入分(fēn)液漏斗中（也能(néng)在烧杯中进行）； 3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后，静至分(fēn)层；放出下层黄色酚液，弃上层； 4、加固體(tǐ)Tris约1g/100ml酚，摇匀，去水相； 5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次，至PH為(wèi)8.0； 6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存； 7、如黄色消失或呈粉红色，则不能(néng)使用(yòng)。 Tris饱和酚具有(yǒu)毒性，对皮肤和人體(tǐ)有(yǒu)着强烈刺激性作用(yòng)，需要在通风橱中进行操作。避免危害，安全第一。 韵邦生物(wù)作為(wèi)一家专业从事體(tǐ)外诊断试剂原料、生物(wù)缓冲剂、生物(wù)清洗剂、医药原料中间體(tǐ)及精细化學(xué)品研发、生产和销售于一體(tǐ)的高新(xīn)技术企业，韵邦提供大量现货：生物(wù)缓冲剂包括 Tris，Bicine，HEPES，BIS-TRIS，TES，MOPS等，能(néng)满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，如果您需要了解更多(duō)关于生物(wù)缓冲剂的内容，请访问韵邦官网，网址：www.ybapi.com。 备注：该信息来源网络转载如有(yǒu)侵权或雷同请联系我们删除。
